Benedict 2.5lt – Διάλυμα Βενεδικτίνης

Benedict 2.5lt – Διάλυμα Βενεδικτίνης

Benedict 2.5lt – Διάλυμα Βενεδικτίνης

Για ποιοτικό προσδιορισμό της γλυκόζης

(For qualitative determination of glucose)

Ονομάστηκε από τον Αμερικανό χημικό Stanley Rossiter Benedict. Το αντιδραστήριο Benedict (συχνά ονομάζεται ποιοτικό διάλυμα Benedict ή διάλυμα Benedict) είναι ένα χημικό αντιδραστήριο και σύνθετο μείγμα ανθρακικού νατρίου, κιτρικού νατρίου και πενταένυδρου θειικού χαλκού (II). Χρησιμοποιείται συχνά στη θέση του διαλύματος Fehling για την ανίχνευση της παρουσίας αναγωγικών σακχάρων. Η παρουσία άλλων αναγωγικών ουσιών δίνει επίσης θετικό αποτέλεσμα. Τέτοιες δοκιμές που χρησιμοποιούν αυτό το αντιδραστήριο ονομάζονται δοκιμές του Benedict. Ένα θετικό τεστ με το αντιδραστήριο του Βενέδικτου φαίνεται από μια αλλαγή χρώματος από καθαρό μπλε σε κόκκινο με ένα ίζημα.

Αναλυτική περιγραφή

Γενικά, η δοκιμή του Benedict ανιχνεύει την παρουσία αλδεϋδών, άλφα-υδροξυ-κετονών και ημιακετάλων, συμπεριλαμβανομένων εκείνων που εμφανίζονται σε ορισμένες κετόζες. Έτσι, αν και η φρουκτόζη κετόζης δεν είναι αυστηρά αναγωγικό σάκχαρο, είναι μια άλφα-υδροξυ-κετόνη και δίνει θετικό τεστ επειδή μετατρέπεται σε γλυκόζη και μαννόζη αλδόζων από τη βάση στο αντιδραστήριο.

Η δοκιμή του Benedict λειτουργεί με τη μείωση των σακχάρων που θερμαίνονται παρουσία ενός αλκαλίου σε ισχυρά αναγωγικά είδη γνωστά ως ενεδιόλες. Οι νεοσυσταθείσες ενεδιόλες προχωρούν στη μείωση των ενώσεων χαλκού (Cu2 +) που υπάρχουν στο αντιδραστήριο του Benedict σε ενώσεις χαλκού (Cu +) οι οποίες καταβυθίζονται ως αδιάλυτο ερυθρό οξείδιο χαλκού (Ι) (Cu2O).

Για να ελεγχθεί η παρουσία μονοσακχαριτών και να μειωθούν τα σάκχαρα δισακχαριτών στα τρόφιμα, το δείγμα τροφής διαλύεται σε νερό και προστίθεται μια μικρή ποσότητα αντιδραστηρίου Benedict. Κατά τη διάρκεια ενός λουτρού νερού, το οποίο συνήθως είναι 4-10 λεπτά, το διάλυμα πρέπει να προχωρήσει μέσα από τα χρώματα του μπλε (χωρίς να υπάρχει αναγωγική ζάχαρη), πορτοκαλί, κίτρινο, πράσινο, κόκκινο και έπειτα ίζημα από κόκκινο τούβλο ή καφέ (εάν υπάρχει υψηλή συγκέντρωση υπάρχει μείωση της ζάχαρης). Μια αλλαγή χρώματος θα σήμαινε την παρουσία ενός αναγωγικού σακχάρου.
Οι κοινές λακτόζη και μαλτόζη δισακχαριτών ανιχνεύονται απευθείας από το αντιδραστήριο Benedict επειδή το καθένα περιέχει γλυκόζη με ελεύθερη αναγωγική ομάδα αλδεϋδης μετά τον ισομερισμό.

Η σακχαρόζη (επιτραπέζιο σάκχαρο) περιέχει δύο σάκχαρα (φρουκτόζη και γλυκόζη) που συνδέονται με τον γλυκοσιδικό δεσμό τους με τέτοιο τρόπο ώστε να αποτρέπεται η υποβολή ισομερισμού γλυκόζης σε αλδεϋδη ή φρουκτόζη σε μορφή άλφα-υδροξυ-κετόνης. Η σακχαρόζη είναι επομένως ένα μη αναγωγικό σάκχαρο που δεν αντιδρά με το αντιδραστήριο του Benedict. Ωστόσο, η σακχαρόζη παράγει έμμεσα ένα θετικό αποτέλεσμα με το αντιδραστήριο Benedict εάν θερμανθεί με αραιό υδροχλωρικό οξύ πριν από τη δοκιμή, αν και τροποποιείται κατά τη διάρκεια αυτής της επεξεργασίας καθώς οι όξινες συνθήκες και η θερμότητα σπάζουν τον γλυκοσιδικό δεσμό σε σακχαρόζη μέσω υδρόλυσης. Τα προϊόντα της αποσύνθεσης της σακχαρόζης είναι η γλυκόζη και η φρουκτόζη, και οι δύο μπορούν να ανιχνευθούν από το αντιδραστήριο Benedict όπως περιγράφεται παραπάνω.

Τα άμυλα δεν αντιδρούν ή αντιδρούν πολύ άσχημα με το αντιδραστήριο του Benedict λόγω του σχετικά μικρού αριθμού μειωτικών τμημάτων σακχάρου που εμφανίζονται μόνο στα άκρα των υδατανθράκων αλυσίδων. Άλλοι υδατάνθρακες που παράγουν αρνητικό αποτέλεσμα περιλαμβάνουν την ινοσιτόλη.

Το αντιδραστήριο Benedict μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για τον έλεγχο της παρουσίας γλυκόζης στα ούρα, υψηλά επίπεδα των οποίων είναι γνωστή ως γλυκοζουρία. Η γλυκοζουρία μπορεί να είναι ενδεικτική του σακχαρώδους διαβήτη, αλλά το τεστ του Benedict δεν συνιστάται ή χρησιμοποιείται για τη διάγνωση της προαναφερθείσας κατάστασης. Αυτό οφείλεται στην πιθανότητα αντίδρασης στην οποία η παρουσία άλλων αναγωγικών ουσιών όπως το ασκορβικό οξύ, τα φάρμακα (λεβοντόπα, η αντίθεση που χρησιμοποιείται σε ακτινολογικές διαδικασίες) και το ομοιογενές οξύ (αλκαπτονουρία) δημιουργούν ένα ψευδώς θετικό.

Καθώς το χρώμα του λαμβανόμενου ιζήματος μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να συναχθεί η ποσότητα σακχάρου που υπάρχει στο διάλυμα, η δοκιμή είναι ημι-ποσοτική. Ένα πρασινωπό ίζημα υποδεικνύει συγκέντρωση περίπου 0,5 g%. το κίτρινο ίζημα δείχνει συγκέντρωση 1 g%. το πορτοκαλί δείχνει συγκέντρωση 1,5 g%. και το κόκκινο δείχνει συγκέντρωση 2 g% ή μεγαλύτερη.

Σύνθεση και προετοιμασία
Η λύση του Benedict είναι βαθύ μπλε. Είναι ένα υδατικό αλκαλικό μείγμα CuS04 και κιτρικού νατρίου. Το κιτρικό νάτριο δρα ως παράγοντας συμπλοκοποίησης που χρησιμεύει για τη διατήρηση του Cu2 + σε διάλυμα, το οποίο διαφορετικά θα καθιζάνει ως ανθρακικό χαλκό. Ένα λίτρο διαλύματος Benedict περιέχει 173 γραμμάρια κιτρικού νατρίου, 100 γραμμάρια ανθρακικού νατρίου και 17,3 γραμμάρια πενταένυδρου θειικού χαλκού. Αντιδρά χημικά παρόμοια με το διάλυμα του Fehling. το ιόν του χαλκού (συμπλοκοποιημένο με κιτρικά ιόντα) ανάγεται σε ιόν του χαλκού από την ομάδα αλδεΰδης (η οποία οξειδώνεται), και καθιζάνει ως οξείδιο του χαλκού, Cu2O.